Для увеличения количества микобактерий туберкулеза (МБТ) в единице исследуемого объема мокроты используют методы флотации и седиментации. В современных клиниках используют метод флотации. Этот метод основан на том, что при встряхивании двух жидкостей с разной плотностью, более легкая жидкость всплывает наверх вместе с микобактериями туберкулеза, находящимися в суспензии.

Для исследования методом флотации мокроту помещают в колбу, добавляют раствор щелочи и встряхивают, пока мокрота станет гомогенной. Чтобы достичь полной гомогенизации, колбу с мокротой подогревают на водяной бане при температуре 56 ° С.

Далее в колбу вливают дистиллированную воду и ксилола или бензола и снова встряхивают. Потом доливают дистиллированную воду до горлышка бутылки и оставляют стоять около 30 минут. На поверхность жидкости всплывает пена, которую пипеткой отсасывают и наносят на предметное стекло. Слой пены на предметном стекле высушивают и наносят новый слой пены из колбы. Так наслаивают пену 5-6 раз, после чего мазок фиксируют и окрашивают по Цилю-Нильсену.

Бактериологический метод выявления МБТ заключается в посеве мокроты на питательные среды. Перед посевом мокроту обрабатывают с целью подавления роста неспецифической микрофлоры. Стандартной питательной средой для выращивания МБТ является твердая яичная среда Левенштейна - Йенсена. В последние годы широкое применение получила яичная среда II, предложенная Э. Р. Финном.

Существуют также полужидкие и жидкие питательные среды. Рост культуры происходит в течение 14-90 дней.

Для выделения культуры МБТ достаточно 20100 микробных клеток в 1 мл мокроты. Если есть микобактерии, обнаруженные культуральным методом, обязательно определяют чувствительность МБТ к химиопрепаратам. Для быстрой установки лекарственной резистентности используется среда Попеску. Чувствительность к химиопрепаратам может определяться как в отдельных препаратах, так и в их комбинаций.

Нередко обнаруженные при бактериоскопии МБТ не растут на питательных средах вследствие потери способности к размножению под влиянием химиопрепаратов.

Чувствительность вышеуказанных методов при диагностике внелегочных форм туберкулеза заметно снижается. За последние десятилетия в развитых странах мира бактериологические методы существенно усовершенствованы. Фирмами «Organon Teknika» и «Becton Dickinson» (США) предложены автоматические анализаторы бактериологических культур «MB / Bact», «BACTEC 960», в которых используются жидкие селективные питательные среды.

Метод основан на регистрации CO2, выделяемого жизнеспособными микобактерии. Эти анализаторы позволяют получить положительный результат анализа на патогенные микобактерии на 12-й день, а отрицательный результат на 21-й день. Однако высокая стоимость оборудования делает его недоступным для большинства медицинских учреждений. В нашей стране этот метод не нашел широкого распространения.